Biopsia Líquida

Visão geral

Amostras de biopsia líquida material molecular derramado por tumores em circulação ou outros fluidos acessíveis. O ADN tumoral circulante pode revelar mutações somáticas, alterações de número-cópias e padrões da metilação ou características dos fragmentos enquanto as células tumorais em circulação são informações sobre a célula celular. A fração do material derivado de tumores varia fortemente com o local da doença, a carga e tratamento.

Fundações técnicas

O DNA livre de células consiste principalmente em fragmentos nucleossômico curto, liberado durante a morte celular. As moléculas derivadas do tumor podem apresentar mutações, metilação alterada ou desequilíbrio de número-cópia e parâmetros distintivo. A contagem esperada de moléculas raras segue as estatísticas da amostragem: em fração muito baixa, desenhar mais leituras sequenciais não consegue recuperar molécula que nunca entrou no tubo. Grupo de códigos moleculares copiam um fragmento original e o consenso que chama suprime erros da polimerização. O fundo biológico proveniente de tecidos normais estabelece um limite adicional para além da precisão do instrumento.

Como funciona

O plasma é separado rapidamente para limitar a contaminação das células sanguíneas liseadas. Os ensaios enriquecem, então e em geral as regiões genômicas ou sequência alvo com códigos de barras moleculares que distingueem moléculas originais dos erros da amplificação. Os gasodutos bioinformáticos suprimem o ruído de sequenciamento e as varianteserigem dos clone. Os resultados podem apoiar a seleção da terapia, o monitoramento de tratamento-resposta e detecção residual ou investigação precoce.

Métodos de medição e pesquisa

A validação do ensaio utiliza materiais de referência que abrangem o tipo variante e a fração alélica, doadores negativos ou reprodutibilidade entre operadores. Estudos pré-analíticos de ensaio tubo para recolha, atraso no processamento e armazenamento do plasma. O desempenho analítico relata o limite de em branco, detecção e quantificação ao invés do número da sensibilidade. Estudos clínicos compararam os resultados plasmáticos com tecidos, imagens e desfechos na população pretendida. Os ensaios de doença mínima-residual longitudinal requerem tempos pré definidos para amostragem e limiares cegos, a fimde evitar interpretar o ruído após os desfechos serem conhecidos.

Ideias-chave

• Um teste negativo pode reflectir uma baixa descamação ou amostragem insuficiente, em vez da ausência do cancro.
• A hematopoiese clonal pode imitar mutações tumorais, a menos que seja utilizada uma análise de células sanguíneas ou filtragem validada.
• A detecção analítica, a validade clínica e o benefício demonstrado do doente são níveis de evidência distintos.

Fronteira actual da investigação

Pesquisas combinam sequência, metilação e fragmentômicas. Proteína de proteínas com variáveis clínicas para melhorar a detecção precoce do tecido da origem Ensaios personalizados acompanham mutações selecionadas do tumor de um doente, enquanto testes sem tumores procuram uma utilização mais ampla e não tecido. As questões abertas incluem como gerenciar os positivos indeterminados e qual intervenção melhora a sobrevida após recidiva molecular é detectada mais cedo do que as imagens. O rastreamento populacional exige especificidade muito alta, pois os falsos positivos acumulam-se quando a prevalência é baixa e tornam essenciais ensaios prospectivos de desfecho ou vias equitativamente seguida.

Por que importa

A repetição da amostragem sanguínea pode detectar a evolução tumoral mais facilmente do que uma biópsia tecidual repetida e capturar ADN de vários locais metastáticos. A biópsia líquida já apoia decisões de tratamento molecular selecionadas e está sendo estudada para a vigilância das recidivas, além da triagem multicancerígena.

Limites e questões em aberto

Fracções variantes muito baixas exigem rigoroso controlo de contaminação e limiares estatísticos. O tecido continua sendo necessário para a histologia e muitos diagnósticos. A triagem pode criar falsos positivos, resultados incertos de tecido da origem e sobrediagnóstico. Portanto a utilidade clínica requer ensaios prospectivo que demonstrem se o teste leva ao tratamento mais precoce eficaz sem dano excessivo ?